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臭氧对预防禽流感有不错的效果
点击次数:1292 发布时间:2013-05-08

 臭氧具有不稳定特性和很强的氧化能力。臭氧是由一个氧分子(O2)携带一个氧原子(O)组成,是氧气的同素异形体。与氧气相比,臭氧比重大、有味、有色、易溶于水、易分解。由于臭氧(O3)是由氧分子携带一个氧原子组成,决定了它只是一种暂存形态,携带的氧原子除氧化用掉外,剩余的双组合为氧气(O2)进入稳定状态。所以臭氧工作中没有二次污染产生,这是臭氧技术应用的大优越性。

    臭氧的应用主要是灭菌消毒。这主要是因为臭氧有极强的氧化能力,臭氧在一定浓度下能与细菌、病毒、病原体等微生物产生生化反应。臭氧具有很高的能量,在常温、常压下很快自行分解为氧(O2)和单个氧原子(O),单个氧原子具有很强的活性,对细菌、病毒、病原体等微生物具有较强的氧化作用。

    臭氧能氧化分解细菌、病毒内部氧化葡萄糖所必须的葡萄糖氧化酶,并直接与细菌、病毒发生作用,氧化并穿透其细胞壁,破坏其细胞器和核糖核酸,分解DNARNA、蛋白质、脂质类和多糖等大分子聚合物,使细菌、病毒的新陈代谢和繁殖过程遭到破坏,而夺取细菌病毒的生命。同时还可以渗透细胞膜组织,侵入细胞膜内作用于外膜脂蛋白和内部的脂多糖,使细胞发生通透性畸变,导致细胞溶解性死亡,并将死亡菌体内的遗传基因、寄生菌种、寄生病毒粒子、噬菌体、支原体及热源(内毒素)等溶解死亡。综观无菌技术对微生物作用的原理可分为抑菌型、杀菌和溶菌型三种。臭氧灭菌消毒属于溶菌型剂体,可以达到长、*地消灭物体内部所有微生物的目的,而且它的作用是瞬间完成的。

    臭氧作为性能优良的消毒手段,在制药企业GMP、医疗卫生场所、食品加工车间、养殖业企业和居民日常生活等许多领域都大规模应用,被称为绿色消毒剂,在卫生部《消毒技术规范》等技术标准中对臭氧杀菌消毒都有明确的肯定。

二、禽流感描述
  
禽流感是一种由正黏病毒科A型流感病毒引起禽类从呼吸系统到严重全身败血症等多种症状的传染病,这类流感病毒有大量天然宿主。高致病性禽流感病毒的传播是多维的,如空气、粪便、饲料和饮水等;近年来蔓延全球的烈性禽类传染病,暴发频率呈几何级数增加,并已跨越种间隔离袭击和传染人类。禽流感病毒传染给人的死亡率高达60%。到目前为止,世界上大约有60人死于禽流感。如果禽流感交叉感染反复发作,病毒基因极易发生变异,就有可能造成人与人之间传播的灾难,后果不堪设想。禽流感问题已不仅是关系食品安全的一般问题,而是危机人类的健康、生存和发展的严重问题。如何克服目前防控体系的缺陷,降低病毒的变异速度,有效地阻断病毒的传播途径,创建新型的防控体系是解决禽流感问题的关键所在。

三、实验方法:
3
1实验方法  
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11体外灭活实验  
按照实验室用臭氧发生器使用说明书规定程序操作,对负压隔离器1立方米密闭空间内放置的涂布有禽流感病毒(H5N2悬液和干燥病毒样品的载波片分别进行10分钟、15分钟、20分钟和30分钟的消毒效果检测;不同处理的样品分别接种49-10日龄SPF鸡胚,每胚0.2ml,经3772小时孵化,去掉24小时内死胚。用0.5%鸡红血球悬液与鸡胚尿囊液做血凝实验。  
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12空气中病毒传播阻断实验  
于两台负压隔离器内各饲养8周龄SPF15只,其中一组作为对照;按照实验室用广州环伟臭氧发生器使用说明书规定程序操作,保持负压隔离器温度为22,湿度50%,打开广州环伟臭氧发生器保持2L/min气体流量;隔离器内通入臭氧10分钟后通过气溶胶发生器向隔离器内2ML107.5EID50/0.1mlH5亚型(H5N2)病毒悬液;继续通入臭氧60分钟后关闭臭氧发生器;7天后无菌采集隔离器内SPF鸡肺脏,对照组与实验组每只SPF鸡肺脏研磨悬液接种49-10日龄SPF鸡胚,每胚0.2ml,3772小时孵化,去掉24小时内死胚。用0.5%鸡红血球悬液与鸡胚尿囊液做血凝实验。  
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13接种后同居感染实验  
于两台负压隔离器内各放入128周龄SPF鸡,各选2只接种H5N2亚型禽流感病毒,接种剂量为107.5EID50/0.1ml,肌肉注射0.2ml/只。每组其余10SPF鸡不攻毒,作为同居感染试验;按照实验室用广州环伟臭氧发生器使用说明书规定程序操作,保持负压隔离器温度为22,湿度50%,于攻毒后的第二天对其中一台负压隔离器接通广州环伟臭氧发生器(保持2L/min气体流量,设定为每工作1小时停机10分钟);于攻毒后第2天开始分别采集隔离器内未攻毒SPF鸡咽拭子,对照组与实验组每只SPF鸡咽拭子接种411日龄SPF鸡胚,每胚0.2ml,经3772小时孵化,去掉24小时内死胚。用0.5%鸡红血球悬液与鸡胚尿囊液做血凝实验;于攻毒后7天分别无菌采集隔离器内未攻毒SPF鸡肺脏,对照组与实验组每只SPF鸡肺脏研磨悬液接种411日龄SPF鸡胚,每胚0.2ml,经3772小时孵化,去掉24小时内死胚。用0.5%鸡红血球悬液与鸡胚尿囊液做血凝实验。
四、实验分析与结论:
4.1
体外灭活实验  
涂布有禽流感病毒(H5N2悬液的品载玻片与H5N2病毒干燥样品载玻片通过20分钟的高能态臭氧的处理后,鸡胚病毒感染培养的结果均为阴性,即不能培养出禽流感病毒;而未经臭氧处理的样品则可以 的培养出病毒。这一结果表明臭氧对禽流感病毒的体外灭活作用是 有效的。  
4.2
空气中病毒传播阻断实验  
血凝检测结果是:对照组(即不施用臭氧组)的15SPF 鸡种, 其中有10支表现出鸡肺脏接种鸡胚尿囊液血凝实验阳性, 5是阴性,阳性率为66.7%;施用臭氧组,15只鸡的血凝实验均为阴性;
空气中病毒传播阻断实验表明,本实验所采用的病毒悬液的喷雾在隔离室内具有强的传染特性,其七天内的感染率高达66.7%。这一点证明我们所采用的方法是研究臭氧灭活禽流感病毒的有效的模式。施用臭氧组的15只鸡的血凝实验均为阴性。这一结果表明臭氧对空气中的禽流感病毒具有100%的灭活效果,可以充分地阻断病毒在空气中的传播,抑制空气中禽流感病毒对鸡的感染。  
4.3
接种后同居感染实验  
对照组(即未施用臭氧组)的未攻毒10SPF鸡与接种H5N2亚型禽流感病毒的鸡接触后第三天,其中5只咽拭子接种的鸡胚尿囊液血凝实验结果为阳性;在接触后的第四天有9只咽拭子接种的鸡胚尿囊液血凝实验结果为阳性; 在接触后的第七天,该9支鸡肺脏研磨悬液接种鸡胚尿囊液血凝实验均为阳性,其同居接触感染率高达90%   
施用臭氧的实验组的未攻毒10SPF鸡与接种H5N2亚型禽流感病毒的鸡接触后第三天的咽拭子接种的鸡胚尿囊液血凝实验未出现阳性,在第四天有5只表现出了阳性;在第七天有6只鸡的鸡肺脏研磨悬液接种鸡胚尿囊液血凝实验表现为阳性,其同居接触感染率为60% 。同居感染实验的结果说明:施用臭氧表现出臭氧具有延迟接触传染时间的现象,起到了阻碍禽流感传染的作用。

广州环伟臭氧发生器:
原载: 养殖场臭氧发生器
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